Trealamh Measúnaithe Glúcóis Kangte - Modh Heicsokinase

Is é glúcós an móilín breosla uileláithreach sa bhitheolaíocht. Tá sé ocsaídithe go uisce, dé-ocsaíd charbóin agus an móilín fuinnimh uilíoch ATP. Tá an leibhéal glúcóis i sampla fola daonna ina phríomh-pharaiméadair dhiagnóiseach le haghaidh neamhoird meitibileach. Baineann leibhéil mhéadaithe glúcóis le diaibéiteas mellitus, faireoga thyroid hyperactive agus pituitary, agus hypopituitarism. Thairis sin, tá laghdú ar leibhéal glúcóis fola bainteach le myxedema agus siondróm hypopituary. Baintear úsáid as trealamh measúnaithe glúcóis i bhfionnadh drugaí toisc nach bhfuil réamhchóireáil ag teastáil uathu agus is féidir leo an leibhéal glúcóis i samplaí a bhrath ag aon trach.

Is tástáil 96-tobar microtiter bunaithe ar phláta é trealamh measúnaithe glúcóis chun an glúcóis iomlán i samplaí agus i mbianna bitheolaíocha a thomhas. Tá imoibrithe leordhóthanacha ann chun 500 measúnacht a dhéanamh. Cinntear an tiúchan glúcóis sa sampla trí chomparáid a dhéanamh le caighdeán glúcóis aitheanta. Oibríonn an modh seo is fearr nuair a bhíonn an tiúchan glúcóis níos lú ná 1.56 mM. De rogha air sin, úsáidtear trealamh ina bhfuil béite-D-glúcóis nó D-glúcóis Oxidase.

Féach ar na sonraí ag https://www.zjkangte.com/product/carbohydrate-metabolism/glu-glucose-assay-kit-hexokinase-method.html

Éilíonn an trealamh measúnaithe glúcóis go n-úsáidfear cealla Jurket agus HepG2. Caithfidh an tiúchan glúcóis sna lysates cille a bheith níos lú ná 5 mM. Moltar uisce UltraPure le haghaidh na dtorthaí is fearr, cé nach bhfuil sé ag teastáil le haghaidh gach measúnachta. Is gnách go mbíonn an titer mar thoradh air laistigh de raon líneach an chuair chaighdeánaigh. Murab ionann agus an bunleagan, tagann an trealamh measúnaithe glúcóis i méideanna trialach.

Is é 10 mM an tiúchan uasta a bhraitheann an trealamh seo. Ríomhtar an teorainn is airde braite den trealamh measúnaithe glúcóis seo tríd an gCaighdeán is airde a iolrú leis an toirt is ísle. Tá méid trialach den trealamh measúnaithe glúcóis seo ar fáil freisin, dóibh siúd nach bhfuil ag iarraidh sampla iomlán a úsáid. Is é seilfré na feisteáin ná 6 mhí. Moltar na feadáin tástála a ordú i gcainníochtaí móra agus iad a rith tríd an bprótacal arís agus arís eile.

Teastaíonn 1 x 10 5 Jurket agus 2 x 10 6 ceall HepG2 ón trealamh measúnaithe glúcóis. Ag brath ar cheimic do shamplaí, is féidir leat an trealamh measúnaithe glúcóis K606 nó K686 a úsáid chun anailís a dhéanamh. Tá sé tábhachtach a thabhairt faoi deara, áfach, go bhfuil difríochtaí idir an dá cheann. Mar shampla, is é an measúnú glúcóis K606 rogha níos fearr do shampla ina bhfuil cuid mhór de shiúcrós.

I gcás an chuid is mó d’fheisteáin measúnaithe glúcóis, ní mór sampla a ullmhú do na tástálacha. Ba chóir na cealla a reoite i -80C ar feadh 20 nóiméad ar a mhéad. Chun leibhéal ard siúcra a sheachaint, bain úsáid as maolán le níos lú ná 10% siúcra. I gcás formhór na samplaí, tá pH de 6.0 oiriúnach. Má tá an sampla á thástáil agat sa tsaotharlann, tá tiúchan íseal siúcra inghlactha. I gcásanna áirithe, d'fhéadfadh íogaireacht chuí a bheith ag an trealamh do diabetics.

I gcás samplaí ardcháilíochta, tá tiúchan ard de shiúcrós ag teastáil ón trealamh measúnaithe glúcóis. Mar sin, ní mór duit a chinntiú go bhfuil an sampla de thiúchan íseal siúcrós. Ní mór an trealamh a úsáid le haghaidh diabetics. D'fhéadfadh sé seo cur isteach ar cháilíocht na dtorthaí. Braitheann íogaireacht na tástála ar an méid siúcra atá sa sampla. Íogaireacht na tástála. Mar sin féin, is uirlis iontaofa é an trealamh measúnaithe glúcóis chun leibhéil siúcra fola a bhrath i samplaí éagsúla.

Tá trealamh measúnaithe glúcóis ar fáil do diabetics atá ag iarraidh láithreacht glúcóis i sampla fola a bhrath. Braitheann cáilíocht an mheasúnaithe glúcóis ar na samplaí. Ba cheart go mbeadh tiúchan íseal siúcrós sna samplaí. Mar sin, ní mholtar sampla ard-siúcra. Tá cineálacha éagsúla feisteáin ann do mheasúnacht ard-shiúcrós. Tá na feisteáin mheasúnachta K606 i gceist le haghaidh diabetics agus na cinn K688.

Tá sé tábhachtach a thabhairt faoi deara go moltar an trealamh measúnaithe glúcóis le haghaidh samplaí le tiúchan íseal-siúcrós, ós rud é go bhféadfadh sé cur isteach ar thorthaí na tástála. Ní gá an sampla céanna a úsáid gach uair. Beidh an tiúchan glúcóis níos airde in ann na difríochtaí sa sampla a aithint níos fearr, rud a fheabhsóidh a iontaofacht. Is féidir le leibhéal íseal siúcrós difear a dhéanamh freisin ar chruinneas na tástála.

Tá an Trealamh Measúnachta Glúcóis deartha le haghaidh samplaí éagsúla. Tá sé ag luí le roinnt samplaí éagsúla agus ní gá lártheifneoiriú samplacha nó colúin casadh. Ní éilíonn sé réitigh neodraithe. Mar gheall ar a bhformáid 96-tobar tá sé éasca anailís a dhéanamh ar chineálacha éagsúla samplaí. Tá an trealamh measúnaithe bunaithe ar na leibhéil glúcóis i sampla fola.