Trealamh Measúnaithe Adenosine Deaminase Ardchaighdeáin

Is einsím nádúrtha é Adenosine Deaminase (ADA) a bhfuil baint aige leis an bhfreagra imdhíonachta. Is é feidhm Adenosine Diphosphate (ADP) na cealla a ghníomhachtú agus tréscaoilteacht membrane agus éifeacht citotocsaineach a dhéanamh. Tá Adenosine aitheanta mar cheann de na aimínaigéid is tábhachtaí a theastaíonn le haghaidh gnáthghníomhaíocht inchinn an duine. Déantar é a shintéisiú ag an ae agus déantar é a dháileadh i bplasma fola trí ghníomhartha an chórais imdhíonachta. Is iompróir an ábhair ghéiniteach frithvíreasach é Adenosine Diphosphate. In Expo Bithleighis, úsáidfear Kit Measúnachta Gníomhaíochta ADA i gcomhcheangal leis an BioVision Cytokine a luadh cheana.

Is iompróir fachtóir fáis T-limficítí é diphosphate Adenosine (ADP). Sa BioVision Cytokine, baintear adenosine deaminase (ADO) as an duán scartha agus déantar anailís air trí úsáid a bhaint as measúnacht uathoibrithe speictrophotometric atá ar fáil go tráchtála. Rinneadh an t-imoibrí a réamhchóireáil le frith-fosfa-dGlúcós (PI) chun a imoibriú leis an anailít a chosc.

Áirítear dhá phríomh-chomhpháirt i gcomhdhéanamh Kit Measúnaithe Gníomhaíochta AIDA atá ar fáil ar bhonn tráchtála - an t-imoibrí agus an trealamh saotharlainne. I measc na n-imoibrithe atá i bhFeiste Measúnaithe Gníomhaíochta Aida tá manglam einsím íonaithe (Sigma-FCA). Tá an trealamh saotharlainne comhdhéanta de scanóir microplate (suite taobh thiar de sleamhnán micreascóp gloine), earraí gloine, leabhar torthaí cuar caighdeánach, agus buidéal sruthlaithe. Sula n-úsáidfear é, ní mór na samplaí den Fhoireann Measúnachta Gníomhaíochta Aida a ní le huisce dí-chlóirínithe. Níl úsáid imoibrí agus an trealamh saotharlainne teoranta do thástálacha saotharlainne amháin.

Chun scrúdú a dhéanamh ar chumas Kit Measúnachta Gníomhaíochta Aida gníomhaíocht iomlán adenosine deaminase a thomhas, rinneadh roinnt seisiún turgnamhach. Ceithre lá de rianú láimhe a bhí sa chéad seisiún. Rinneadh céad caoga micrilítear Aida-GFP a thuaslagadh in uisce sconna agus measctha le tuaslagán salainn maolánach fosfáit. Tar éis fiche nóiméad, tástáladh na samplaí ar scáileán mais-chomhardaithe HPLC.

Áiríodh sa dara seisiún dhá lá breise de rianú láimhe. Instealladh samplaí isteach sa caiséad cuar ar feadh dhá uair an chloig mar a thuairiscítear thuas. Áiríodh sa tríú seisiún trí lá breise de rianú láimhe sa seomra céanna, agus ceithre huaire an chloig d’instealltaí subcutaneous de adenosine deaminase (ADCA) ina dhiaidh sin. Tarraingíodh an sampla fola tar éis uair an chloig le haghaidh anailíse.

Le haghaidh tástála seile, rinneadh cúig chéad microliters de réitigh chaighdeánacha deaminase agus pH ardaigh a mheascadh i bpunch neamh-steiriúil. Bhí cead ag na muca raon iomlán leachtanna a ól, ó uisce glan go sóid aiste bia, mar ba mhian leo. Nuair a shroich na réitigh chaighdeánacha a bhfiuchphointe, cuireadh dropper le toirt réamhchinnte seile isteach agus rinneadh gníomhaíocht adenosine deaminase a thomhas.

Rinneadh anailís ar an ngrúpa deiridh de shé shampla ag baint úsáide as Trealamh Measúnaithe Fosphorimidazoleamine atá bunaithe ar sheile (Saproflavil; Thermo Instruments) atá ar fáil go tráchtála. Sa tsraith measúnachtaí seo, rinneadh braon amháin d'imoibrí Phosphorimidazoleamine/ada salivary a mheascadh le toirt uisce sconna agus cuireadh an púdar triomaithe leis na samplaí. Tar éis tríocha nóiméad, tógadh an dara sampla den sampla céanna. Sa chás seo, rinneadh an ghníomhaíocht sa seile a thomhas láithreach. Bhí an trealamh deartha go sonrach chun gníomhaíocht an aigéid i seile daonna a thomhas. Mar a bheifí ag súil leis, bhí méid suntasach gníomhaíochta ann a d'fhéadfaí a bhrath.

Mar a bheifí ag súil leis, thug an dá anailísí torthaí comhchosúla. Mar gheall ar nádúr an-sonrach na hanailíse Tomagrafaíocht Astaíochta Salivary-Positron (SPECT), mar aon leis an modheolaíocht an-íogair (brath sreabhán ard laistigh den bhéal) bhí cruinneas ard comhsheasmhach agus tomhais shuntasacha. Ba shaineolaithe sa réimse iad an pearsanra saotharlainne a úsáideadh do na nósanna imeachta. Ní raibh aon fhianaise ar éilliú, nó d'aon chineál earráide turgnamh. Thug na hábhair tástála toiliú feasach agus lean an nós imeachta na moltaí a leag Cumann Meiriceánach na Inchríneolaithe Cliniciúla síos. Ar an iomlán, léirigh na torthaí a fuarthas ó Kit Measúnachta Adenosine Deaminase in-atáirgtheacht mhaith, a deimhníodh le staidéir ar leithligh ó shaotharlanna cliniciúla neamhspleácha.